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A型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)和操作步驟

更新時(shí)間:2020-10-24   點(diǎn)擊次數(shù):1696次
  A型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒可用于檢測(cè)豬、牛、羊血清中的A型口蹄疫病毒抗體,用于評(píng)估A型口蹄疫苗免疫狀況。
  A型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒用間接ELISA法,在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被純化的FMD病毒抗原。在試驗(yàn)中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過(guò)溫育后,若樣品中含有FMD病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶結(jié)合物,與檢測(cè)板上的抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化形成藍(lán)色產(chǎn)物,加入終止液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定反應(yīng)孔中的吸光度A值。
  A型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
  試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,應(yīng)將試劑盒各組份放置室溫至少1小時(shí)以上。使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2-8℃。
  不同品種、不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。
  底物和終止液對(duì)皮膚和眼可能有刺激性,使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。
  TMB(顯色液)不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。
  檢測(cè)板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8℃)。
  所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。
  嚴(yán)格遵守操作說(shuō)明可以獲得很好的結(jié)果。操作過(guò)程中移液、定時(shí)和洗滌等的全部過(guò)程必須精確。
  血清稀釋板為一次性用品,不得重復(fù)使用;血清稀釋板的大容量為300μl/孔。
  A型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒操作步驟:
  取預(yù)包被的檢測(cè)板(根據(jù)樣品多少,可拆開(kāi)分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測(cè)板孔中。同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各2孔,取陰性及陽(yáng)性對(duì)照各100μl分別加入反應(yīng)孔中輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。
  蓋上封板膜(可按實(shí)際需要自行裁剪),置37℃溫育30分鐘。
  小心揭開(kāi)封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內(nèi)液體,以上步驟重復(fù)4-6次,后在干凈吸水紙上拍干。
  每孔加酶結(jié)合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
  小心揭開(kāi)封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6次, 方法同3。切記后在干凈吸水紙上拍干。
  每孔加顯色液100?l,輕微震蕩混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。
  每孔加終止液50μl,使反應(yīng)終止,10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。
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